L'associació de polimorfismes genètics del citocrom p450 amb formació de sulfolà i l'eficàcia d'un règim de condicionament basat en busulfan en pacients pediàtrics sotmesos a un trasplantament de cèl·lules mare hematopoietiques | la revista farmacogenòmica

L'associació de polimorfismes genètics del citocrom p450 amb formació de sulfolà i l'eficàcia d'un règim de condicionament basat en busulfan en pacients pediàtrics sotmesos a un trasplantament de cèl·lules mare hematopoietiques | la revista farmacogenòmica

Anonim

Temes

  • Trasplantament de cèl·lules
  • Genètica de malalties
  • Pediatria
  • Farmacogenètica

Resum

Els enzims del citocrom P450 (CYPs) i les monooxigenases que contenen flavin (FMOs) tenen probablement un paper en l’oxidació dels metabòlits intermedis de busulfan (Bu). Estudis in vitro per investigar la implicació d’aquests enzims són molestos a causa de la naturalesa volàtil del metabolit intermediari tetrahidrotiofen (THT) i la manca de mètodes de quantificació sensibles. Aquest estudi va explorar l'associació entre els genotips CYP2C9, CYP2C19, CYP2B6 i FMO3 i els sulfolans (Su, un metabolit soluble en aigua de Bu) en els nens sotmesos a un trasplantament de cèl·lules mare hematopoietiques (HSCT). També es va analitzar la relació entre aquests genotips i l'eficàcia del condicionament mieloablatiu. Seixanta-sis nens que van rebre un règim de condicionament mieloablatiu a base de Bu intravenós van ser genotipats per al·lels variant funcionals comuns a CYP2C9 ( * 2 i * 3 ) , CYP2C19 ( * 2 i * 17 ) , FMO3 ( rs2266780, rs2266782 i rs1736557 ) i CYP2B6 ( * 5 i * 9 ). Els nivells plasmàtics de Bu i el seu metabolit Su es van mesurar després de la novena dosi de Bu en un subconjunt de 44 pacients per als quals es van disposar mostres de plasma. La relació de Bu a Su es va considerar la proporció metabòlica (MR) i es va comparar entre els grups genòtics. Es van observar senyals més alts en portadors d'al·lel CYP2C9 * 2 i * 3 (mitjana ± sd: 7, 8 ± 3, 6 en portadors vs 4, 4 ± 2, 2 en no transportadors; P = 0, 003). Es va observar una incidència més gran de falla d’empelt entre pacients amb un MR> 5 en comparació amb els que tenien valors de MR <5 (20% vs 0%; P = 0, 02). En canvi, es va observar una incidència significativament més gran de fallada de recaiguda i injert (avaluada com a supervivència sense esdeveniments) en pacients amb malaltia maligna que portaven al·lels CYP2B6 amb funció reduïda en els dos cromosomes en comparació amb portadors d'almenys un al·lel normal (100% vs. 40%; P = 0, 0001). Aquests resultats suggereixen que CYP2C9 té un paper en les reaccions d'oxidació de THT i indiquen que pot ser possible predir l'eficàcia del condicionament mieloablatiu basat en Bu abans de HSCT sobre la base de genotips CYP i MR.

Introducció

Busulfan (Bu) és un agent alquilant bifuncional i un component molt utilitzat en els esquemes de condicionament mieloablatiu i no mieloablatiu abans del trasplantament de cèl·lules mare hematopoietiques (HSCT) en nens. 1 Bu es metabolitza per conjugació amb glutatió (GSH), que es catalitza predominantment per glutatió- S -transferasa alfa 1. 2 El conjugat GSH es dissocia a tetrahidrotiofen (THT), que s’oxida al sulfolà (Su) i posteriorment a 3-hidroxi Su. 3, 4 El destí metabòlic de Bu s’exposa breument a la figura 1. La variabilitat interindividual en els nivells de plasma Bu es produeix quan s’administra per via oral o intravenosa; aquesta administració requereix un control de concentració de medicaments per ajustar la dosi i mantenir els nivells de Bu dins del rang terapèutic. 5, 6 La variabilitat observada es pot atribuir a l'activitat enzimàtica que altera el metabolisme de Bu. 7 Com que les isoformes de GST participen principalment en el metabolisme de Bu, diversos estudis han investigat la relació entre variants genètiques dels gens GSTA1 i GSTM1 i la farmacocinètica de Bu. 6, 7, 8, 9, 10, 11

Image

El destí metabòlic del busulfan. Els enzims del citocrom P450 tenen un paper molt important en la formació de sulfolà; no obstant això, es desconeix la subfamília específica dels enzims implicats. CYPs, enzims isoformes del citocrom P450; CTH, gamma-liasa cistatina; DPEP, dipeptidasa / cisteinilglicina; FMO, monooxigenasa que conté flavin; GGT, gamma-glutamil transferasa; Enzims transferasa GSTA1, GSTM1 i GSTP1, glutatió S, subtipus alfa1, mu1 i pi1, respectivament; NAT, N-acetil transferferasa.

Imatge a mida completa

  • Descarregueu la diapositiva de PowerPoint

Els enzims del citocrom P450 (CYPs) probablement estan implicats en les reaccions d'oxidació de THT a Su. 12 Tanmateix, actualment no hi ha dades disponibles per especificar quins CYP estan implicats. Hi ha dades limitades quant a la variabilitat interindividual de l’activitat i nivells d’expressió del CYP en nens. A partir de les observacions de l’expressió alterada i dels volums hepàtics de fetge i adult fetge, l’activitat del CYP pot diferir entre nens i adults o mantenir-se similar per a tots els grups d’edat (per exemple, CYP3A4 / 3A5, 1A2). 13, 14, 15 No obstant això, la presència d’una proporció significativa d’isoformes de CYP2C en els fetges dels nens més petits suggereix la seva importància pel que fa al metabolisme de certs fàrmacs i a l’oxidació dels metabòlits intermedis Bu. 15 CYP, en particular CYP2C9 i CYP2C19, participen en l’oxidació del sofre en THT; CYP2B6 i CYP3A5 també estan implicats fins a un cert punt. 16, 17 A més, probablement les monooxigenases que contenen flavin (FMOs) catalitzen les reaccions d’oxidació dels metabòlits Bu. 18, 19 FMO1 i FMO3 s’expressen predominantment en fetge i fetge adult, respectivament. A la FMO3 de caucàsics del projecte HapMap es va informar tres variants no sinònimes a freqüències superiors al 5%, mentre que FMO1 no té al·lels polimorfs a la regió gènica que codifica. 20 Els estudis in vitro del paper funcional d’isoformes CYP específiques en l’oxidació de Su i THT són difícils a causa de la naturalesa volàtil de THT i la manca de mètodes analítics altament sensibles per quantificar els metabòlits. Recentment, hem desenvolupat i validat un mètode per quantificar Su al plasma de pacients que reben Bu per facilitar les investigacions sobre el paper dels metabòlits Bu. Aquest mètode era prou sensible per detectar nivells de Su in vivo del plasma de pacients que reben dosis més grans de Bu. Utilitzant aquest enfocament per estimar els nivells de Su, vam explorar l’associació entre els genotips CYP2C9 , CYP2C19 , FMO3 i CYP2B6 i la relació metabòlica (MR) de Bu / Su després de la novena dosi. També es va explorar l'associació entre els genotips Bu MR i CYP pel que fa a l'eficàcia del condicionament mieloablatiu.

Resultats

La relació entre genotip i Bu MR

Tots els polimorfismes estudiats (SNPs) dels gens CYP2C9, CYP2C19, FMO3 i CYP2B6 es trobaven en l'equilibri de Hardy-Weinberg entre els 96 voluntaris sans i sense relació (dades no mostrades). Les freqüències de l’al·lel menor i els genotips de 66 pacients es mostren a la taula 3. Tots els SNP estudiats es trobaven en l’equilibri de Hardy-Weinberg en pacients excepte CYP2C9 * 2 .

L’anàlisi entre els MR i els genotips CYP2C9 , CYP2C19 , CYP2B6 i FMO3 va revelar una associació significativa entre els MR i CYP2C9 i CYP2C19 (Taula 2 i Taula complementària 1). Es van observar indicadors de MR més elevats entre els pacients amb al·lel * 2 de CYP2C9 i una combinació dels al·lels * 2 i * 3 (figures 2a i b; P = 0.01) que els que portaven el genotip CYP2C9 * 1 * 1 . En canvi, es va observar una disminució significativa en els signes de portadors de CYP2C19 * 17 en comparació amb pacients sense aquest al·lel (figures 2c, P = 0, 01). La taula 2 mostra els detalls dels genotips CYP2C9 i CYP2C19 pel que fa als signes de MR, així com les dades demogràfiques i de les dades de PK. No es van trobar diferències entre grups per a les distribucions d’edat, pes, diagnòstic, ràtios de dosi Bu (és a dir la relació de la dosi ajustada a la primera dosi administrada) o les dades de la primera dosi PK pel que fa al genotip CYP2C9 (taula) 2); tanmateix, la distribució d’edat diferia entre pacients amb diferents genotips CYP2C19 * 17 . També es va notar una correlació negativa significativa entre l'edat del pacient i el MRM Bu ( r = −0, 34; P = 0, 024; Taula suplementària 2). Els pacients es van estratificar en dos grups de més grans i menors de 4 anys d’edat seguint un pla de dosificació basat en edat. Es van observar diferències en els trams de MR entre els nens més grans i els més petits (Figura 3a, P = 0, 01). També es va analitzar si la relació entre els MR i CYP2C9 / CYP2C19 depenia de l’edat. Es van observar diferències significatives entre grups entre els MR basats en els genotips CYP2C9 i CYP2C19 només entre pacients majors de 4 anys (figures 3b i c; P = 0, 001 i P = 0, 04, respectivament). Quan tots els pacients van ser analitzats mitjançant una regressió lineal multivariant, la inclusió de l’edat juntament amb el genotip CYP2C9 va millorar el model i va explicar ∼ 35% de la variabilitat en els MR, fins al 27% explicat pel genotip CYP2C9 sol ( P = 0, 0001) .

Image

La influència dels genotips CYP2C9 i CYP2C19 sobre el busulfan / sulfolà MR. Els MR es van calcular mitjançant els nivells de Bu i Su mesurats després de la infusió de la novena dosi. Els valors P obtinguts mitjançant les proves Mann – Whitney U es mostren a les parcel·les. ( a ) Els pacients es van dividir en tres grups sobre la base del seu genotip CYP2C9 * 2 : CC ( n = 35), CT ( n = 6) i TT ( n = 3). Els medis de MR ± sd (medians) dels grups anteriors eren de 5, 1 ± 2, 9 (4, 6), 6, 2 ± 1, 5 (6, 2) i 11, 5 ± 2, 8 (13, 1), respectivament. ( b ) Els pacients es van agrupar amb el genotip CYP2C9 * 1 * 1 ( n = 28) o almenys una còpia de * 2 o * 3 ( n = 16). El MR significa ± sd (medians) per a portadors d'al·lel variant i individus amb el genotip * 1 * 1 eren 7, 9 ± 3, 6 (6, 7) i 4, 4 ± 2, 2 (4, 3), respectivament. ( c ) Els pacients es van agrupar sobre la base del genotip CYP2C19 * 17 (CT i TT: n = 14, 3, 9 ± 2, 3 (3, 6); CC: n = 30, 6 ± 3, 3 (5, 5)).

Imatge a mida completa

  • Descarregueu la diapositiva de PowerPoint
Image

La influència de l'edat i dels genotips CYP2C9 i CYP2C19 relacionats amb l'edat en el busulfan / sulfolane MR. ( a ) La mitjana de ± sd (mediana) de MR per a pacients menors de 4 anys ( n = 16) i els majors de 4 anys ( n = 28) eren de 6, 9 ​​± 2, 9 (6, 0) i 4, 9 ± 3, 2 (4, 0), respectivament. ( b ) Els signes genètics CYP2C9 * 2 i * 3 en pacients majors de 4 anys. La mitjana ± sd (mitjana) de portadors CYP2C9 * 1 * 1 ( n = 18) va ser de 3, 7 ± 2, 1 (3, 5); la mitjana ± sd (mediana) dels pacients amb al·lel variant va ser de 7, 3 ± 3, 8 ( n = 10). ( c ) MR amb relació al genotip CYP2C19 * 17 en pacients majors de 4 anys. La mitjana ± sd (mediana) de portadors CC ( n = 16) va ser de 6, 02 ± 3, 5 (5, 2); la mitjana ± sd (mitjana) de portadors de CT o TT ( n = 12) va ser de 3, 6 ± 2, 3 (3, 3).

Imatge a mida completa

  • Descarregueu la diapositiva de PowerPoint

MR, genotip CYP i l'eficàcia del règim de condicionament basat en Bu

Les taules suplementàries 3 i 4 exposen els resultats clínics observats entre els pacients inclosos en el genotipat i les anàlisis de MR. Es va analitzar l’eficàcia del règim de condicionament mieloablatiu com a insuficiència d’empelt i recaiguda de malaltia (en malalties malignes) pel que fa als genotips MR i CYP . Dels 44 pacients inclosos en l’anàlisi de la MR, quatre pacients van morir, quatre pacients van patir una fallida d’empelt i nou pacients (de 27 pacients amb malaltia maligna o pre-maligna) van tornar a patir. Els quatre pacients amb fallida d’empelt van rebre Bu seguit de CY, i tres d’ells tenien sang de cordó com a font d’empelt. En una anàlisi univariada, només el MR i Css ( P = 0, 02) es van associar amb la incidència de falla d’empelt (figura 4a; P = 0, 02). Els quatre pacients amb insuficiència d’empelt van tenir un MR> 5 i un Bu Css per sobre de la mediana (702, 4 ng ml −1 ). D’aquests quatre pacients, dos es van trobar en primera remissió completa (leucèmia mieloide aguda) abans del trasplantament, i els altres dos van ser diagnosticats de síndrome mielodisplàstica. Quatre pacients van morir; dos pacients de cada grup van ser exclosos de l’anàlisi perquè la causa principal de la seva mort va ser la infecció. Tot i això, es van observar resultats similars quan els pacients morts van ser censurats i inclosos en l'anàlisi. No es va trobar una associació significativa de falla d’empelt pel que fa a la font d’empelt ( P = 0.4), diagnòstic ( P <0.1), estat de la malaltia ( P = 0.6), profilaxi GVHD ( P = 0.6), coincidència amb HLA ( P = 1 ), edat ( P = 0, 1), genotips de dosi cel·lular ( P = 0, 6) o CYP2C9 ( P <0, 1) en aquest subconjunt de pacients. L’anàlisi multivariada no va revelar una relació significativa respecte dels MR ( P = 0.2). Un altre factor que influeix en l'eficàcia de Bu és la quantitat total de Bu administrada. Els pacients amb un MR> 5 o <5 van rebre dosis similars de Bu acumulades. Els pacients amb un MR <5 van rebre una dosi Bu (mitjana ± sd) de 16, 3 ± 2, 9 mg kg −1, mentre que els que presentaven un MR> 5 van rebre 15, 7 ± 2, 8 mg kg −1 . Dels 20 pacients amb un MR> 5, tres no van fer cap canvi en la seva dosi, dos van requerir una disminució i 15 van requerir un augment de la dosi. Dels 24 pacients amb un MR <5, dos no han canviat la dosi, tres han requerit una disminució i 19 han requerit un augment de la dosi. No es van observar diferències significatives entre els grups pel que fa a les proporcions de dosi (ajustades a la dosi inicial prescrit), Css o AUC de la primera dosi ajustada a la dosi.

Image

La influència del busulfan MR i del genotip CYP2B6 en la fallada de l'empelt i l'EFS. A la parcel·la es mostra el nombre de pacients amb fallida o recaiguda de l'empelt versus el nombre total de pacients de cada grup, amb els respectius valors P obtinguts per comparacions de rang log. ( a ) La incidència acumulada de falla d’empelt entre pacients amb un MR per sota o per sobre de la mediana. ( b ) EFS (fallada de recaiguda i injert) entre pacients amb tumors malignes i un MR per sota o per sobre de la mediana. ( c ) EFS basats en genotips CYP2B6 .

Imatge a mida completa

  • Descarregueu la diapositiva de PowerPoint

De la mateixa manera, es va observar un EFS millorat (és a dir, les incidències més baixes de recaiguda i rebuig) entre els pacients amb malaltia maligna amb una MR5 (figura 4b; P = 0, 01). Com que la infecció va causar la mort per a la majoria dels pacients, la mort no es va considerar un avantatge o desavantatge de la supervivència sense esdeveniments. Dels tres pacients que van morir, dos estaven en el grup amb un MR5. No es van observar associacions significatives pel que fa a l'estat de la malaltia ( P = 0.2), la dosi cel·lular ( P = 0.7), la font cel·lular ( P = 0.4), el genotip CYP2C9 ( P = 0.2), l'edat (0.2), el gènere ( P = 0.4 ), La profilaxi GVHD ( P = 0, 4) o la coincidència amb HLA (0, 9). No obstant això, el Css es va associar significativament amb l'EFS, amb un EFS millorat entre els pacients amb un valor de Css per sota de la mediana ( P = 0.001). L'anàlisi multivariant va revelar que la MR es va associar de manera independent amb l'EFS (ratio de perillositat (HR) per a MR> 5 = 4, 8, IC del 95% = 1, 2–19, 9; P = 0, 02). Aquests fets només es van produir entre pacients que van rebre el règim de Bu-CY, excepte per a un individu que va rebre Bu-CY i etoposide. No es van observar associacions significatives entre genotips de CYP i altres resultats, com VOD, cistitis hemorràgica o GVHD aguda; no obstant això, es van observar incidències més elevades de VOD i cistitis hemorràgica entre els pacients amb al·lels CYP2C normals.

Si es compara amb la cohort global de 66 pacients, la fallada de l’empelt no es va associar amb genotips CYP2C9 ( P = 0.1) o CYP2B6 ni amb altres co-variants segons una anàlisi univariada. Cinc pacients que van morir abans d’una fallada d’empelt van ser exclosos de la falla d’empelt i de l’anàlisi EFS. EFS es va associar significativament amb el genotip CYP2B6 (Figura 4c, P = 0, 0001) i Css ( P = 0, 03) entre els pacients amb malalties malignes. Es va produir una incidència més gran d’esdeveniments entre pacients que portaven un parell d’al·lels CYP2B6 no funcionals (100%) i valors de Css per sobre de la mediana (60%) en comparació amb els que portaven almenys un al·lel funcional (40%) i valors de Css per sota de la mediana. (31, 6%). Es van excloure de l’anàlisi tres pacients que van morir abans de l’esdeveniment. Es van observar resultats similars després d’incloure els pacients difunts censurats per l’esdeveniment. Finalment, només vam observar les tendències en declivi de l'EFS pel que fa a baix nombre de cèl·lules ( P = 0, 1), font de sang del cordó ( P = 0, 3), HLA no corresponent ( P = 0, 1), condicionant diferent del Bu-CY ( P = 0, 3), gènere femení ( P = 0, 2), estat de malaltia ( P = 0, 3) i portadors d’al·lels CYP2C no funcionals ( P = 0, 3). L'anàlisi multivariant va revelar que el genotip CYP2B 6 estava associat independentment amb EFS (HR per a portadors de genotips no funcionals = 7, 3, 95% CIs = 1, 7-331, 0; P = 0, 007).

Discussió

Genotip de CYP2C9 i Bu / Su MR

Es va observar MR més elevat entre els portadors dels al·lels CYP2C9 * 2 i * 3 , que corresponien a una funció enzimàtica reduïda, mentre que els MR més baixos es van observar entre els portadors de l’al·lelitat CYP2C19 * 17 , al·lel. Curiosament, l’al·lel CYP2C9 * 1 està en fort desequilibri d’enllaç amb l’al·lel CYP2C19 * 17 . 27 A més, es va notar l’augment de freqüència de menors trastorns en pacients majors de 4 anys en el grup amb l’al·lel CYP2C19 * 17 . Així, els MR més baixos observats en els portadors CYP2C19 * 17 poden ser deguts a l’edat i a la presència de l’al·lel CYP2C9 * 1 (un reflex de la funció CYP2C9 normal i la formació Su superior, independentment de l’estat d’al·lel CYP2C19 * 17 ). La nostra conclusió suggereix que CYP2C9 està involucrat en l’oxidació de THT a Su, i els individus amb una activitat enzimàtica inferior han reduït la formació de Su. Vam verificar que aquesta associació no es va deure a diferències en el diagnòstic, ja que els informes suggereixen que afeccions no malignes (per exemple, talassèmia i possibles danys hepàtics) poden afectar la funció metabòlica de l’enzim. 28, 29 Una anàlisi de regressió lineal multivariada, pas a pas, que incloïa diagnòstic, genotipos CYP, FMO3 i edat, va revelar que només l’edat i els al·lels CYP2C9 * 2, * 3 estaven associats amb MRs inferiors i superiors, respectivament. Aquest resultat suggereix que l'estat de la malaltia en el moment del diagnòstic podria no influir en els resultats.

Curiosament, es van observar signes de MR significativament més baixos entre els pacients de 4 anys i més, cosa que indica un augment de l’activitat de CYP en aquest grup d’edat i la implicació de CYPs en la formació de Su. 13, 15 De manera similar, l’associació entre el genotip de MR i CYP2C9 només era evident en aquest grup d’edat; tanmateix, l’absència d’aquest efecte en nens més petits també es podria deure a la petita mida de la mostra. Una diferència significativa entre els genotips CYP2C9 només es va observar pel que fa als MR i no als paràmetres de la primera dosi PK (taula 2), cosa que suggereix que CYP2C9 té un paper en la formació de Su a partir de THT.

MR, genotip CYP i l'eficàcia d'un règim de condicionament basat en Bu

En el grup maligne, els pacients amb un MR per sobre de la mediana presentaven una incidència més elevada de falla d’empelt i disminuïren l’EFS (20 i 23, 1%, respectivament) que els que presentaven un MR per sota de la mediana (0 i 72, 7%, respectivament). Com s'ha observat anteriorment, 22 un MR més alt indica un nivell Bu superior i un nivell Su inferior. aquest últim és molt probable a causa de l’activitat reduïda de CYP2C9 necessària per formar Su. Els valors de MR no es correlacionaven amb la dosi acumulada de Bu rebuda, el Css de Bu o la proporció de dosi (dosi ajustada / primera dosi). No obstant això, a causa que més del 95% dels pacients van rebre CY després de Bu, el major EFS en pacients amb MRs per sota de la mediana (que reflecteix l'activitat CYP2C9 normal) es podria atribuir a la major formació de metabòlits CY actius i a una millor immunosupressió. 30, 31 S'han reportat els rols dels genotips CYP2C9 i 19 en l'activació de CY. 30, 32, 33 Tanmateix, no es va trobar una associació significativa entre les tendències observades per al genotip CYP2C9 i la fallada de l'empelt o l'EFS en malalties malignes, cosa que suggereix que altres enzims tenen un paper tant en la formació de Su com de l'activació CY. 34, 35 Alternativament, aquests resultats poden reflectir una falta de poder per detectar l’associació per la petita mida de la mostra i la implicació de múltiples factors.

Recentment, Hassan i Andersson 36 van proposar un model que il·lustrés el paper dels transportadors de drogues pel que fa a la presència d’ions de sulfon augmentat per determinar la resposta i la toxicitat a Bu. Aquests autors van plantejar la hipòtesi que el conjugat d'ions sulfoni de Bu podria ser un substrat per als transportadors de membrana que, en circumstàncies normals, expulsen conjugats d'ions de sulfoni de les cèl·lules. Tanmateix, l’abast de la formació d’ions sulfonium depèn de la disponibilitat de glutatió per a la conjugació, així com de l’activitat dels enzims conjugadors glutatió- S -transferasa alfa 1 i glutatió- S -transferasa mu1. 11 Basant-nos en les observacions de la nostra cohort, vam plantejar que, a diferència del Bu Css (que s’associa a la toxicitat), l’extensió de la formació de Su pot indicar una conjugació més gran, amb la qual cosa es produeix una major eficàcia de Bu. No obstant això, a causa de la petita mida de la mostra, no hem pogut analitzar les relacions entre la funció transportadora de medicaments, els nivells de plasma Su i la toxicitat; aquestes associacions han de ser avaluades en el futur. No obstant això, nivells més alts de Su també poden indicar un augment de l'esgotament del glutatió com a conjugat d'ions sulfoni; així, l'activitat normal de CYP2C9 pot predisposar els pacients als esdeveniments tòxics iniciats per metabòlits actius de CY quan la conjugació i l'eliminació dels metabòlits actius CY estan compromeses. En aquests pacients, canviar l’ordre de Bu-CY a CY-Bu pot resultar avantatjós per reduir la toxicitat, tal com s’ha informat en estudis clínics retrospectius i prospectius. 37, 38 Com que Su és heterocíclic, pot induir alguns dels CYP implicats en l’activació de CY; així, nivells més alts de Su indiquen una major activació de CY i la seva toxicitat relacionada. Malauradament, no hem pogut recopilar dades de cinètica de CY pel que fa a la formació de Su. Actualment, s'està estudiant aquesta perspectiva per estudiar el nostre centre.

Estudis anteriors utilitzant models animals suggereixen que Su afecta les cèl·lules explosives. 39 En aquest context, la formació de Su augmentat podria indicar la conjugació augmentada de Bu i podria suggerir l’extensió de la reacció d’eliminació de la β de ions sulfonium formats per produir THT (un precursor de Su) i γ-glutamildehidroalanilglicina (un agent glutationil·lant de proteïna irreversible), que pot sensibilitzar les cèl·lules a Bu. 40 El nostre laboratori està estudiant actualment les possibles interaccions entre Bu i Su a concentracions i durades fisiològicament observades respecte a les línies cel·lulars limfoblastoides.

Es va observar una reducció de l’EFS de pacients amb malaltia maligna que eren homozigots per als al·lels CYP2B6 * 5 i * 9 , que han reduït l’activitat enzimàtica, en comparació amb els portadors del genotip * 1 * 1 . CYP2B6 contribueix a l’activació de CY. 35 Aquesta associació observada es podria deure a un augment de la disponibilitat de CY actiu relacionat amb l'al·lel * 1 que condueix a una immunosupressió efectiva i prevé la fallada de l'empelt. Melason et al. 41 també ha analitzat els genotips CYP2B6 pel que fa a resultats HSCT . En contrast amb les nostres observacions, aquests autors van observar que els pacients amb metabolitzadors ultra-ràpids CYP2B6 tenien pitjor supervivència sense progressió que els que tenen metabolitzadors pobres. Diverses raons poden tenir en compte aquesta discrepància; Melason et al. 35, 41 es consideraven portadors de l’al·lel CYP2B6 * 5 (* 1 / * 5 i * 5 / * 5) com a metabolitzadors extensius, cosa que contradiu els informes anteriors de la funció reduïda d’aquest al·lel. Aquests pacients d’aquesta cohort també van rebre una irradiació total del cos; així, es podria haver evitat en gran mesura les ocurrències de recaiguda i rebuig. No es va investigar la presència de variants metabolitzants ultra-ràpides de CYP2B6 . A més, els genotips amb funcions enzimàtiques presumiblement normals també poden incloure metabolitzadors ultra-ràpids. Les nostres observacions recolzen l’estudi que va mostrar una tendència de risc de recaiguda reduïda entre els portadors metabolitzadors normals i ultra-ràpids de CYP2B6 amb leucèmia que van rebre CY i irradiació corporal total abans de HSCT. Els pacients que porten al·lels amb funcionament normal de CYP2B6 també van experimentar un major grau de toxicitat en els primers 100 dies, cosa que suggereix la funció de predicció dels genotips CYP2B6 per als règims de condicionament que contenen CY com un dels components. 42 futurs estudis que examinen l’efecte combinat dels genotips CYP2C19, 2C9 i 2B6 sobre l’activació CY PK i l’activació han d’investigar el paper que podrien tenir en els resultats HSCT relacionats amb la CY. No es va observar una associació entre el genotip CYP2B6 i l’aparició de VOD o cistitis hemorràgica, en contrast amb les troballes de Rocha et al. 43 però en suport dels de Melason et al. 41 Aquesta manca d'associació podria ser deguda al feble poder estadístic del nostre estudi. La potència del nostre estudi per a la incidència de fallada d’empelt observada va ser del 60% en un nivell alfa de 0, 05. Atès el nombre limitat de pacients disponibles, només vam poder detectar tendències poc significatives. Per tant, aquests resultats s’han de replicar en una gran cohort potencial. Finalment, s’hauria d’investigar el paper d’altres variacions genètiques (per exemple, GSTA1 i GSTM1 ) pel que fa a variants genètiques CYP i variants transportadores utilitzant enfocaments d’interacció gen-gen i gen-entorn amb l’entorn per predir els resultats del condicionament basat en Bu abans de HSCT en nens. Diversos altres factors de risc, inclosos els tractaments immunosupressius per a la profilaxi GVHD, font de cèl·lules, nombre de cèl·lules, estat de malaltia, règim de condicionament, co-medicació, concordança amb HLA i estat d’anticossos anti-HLA en font de sang de cordó, també modulen el risc genètic per a l’EFS. Un estudi marcat amb EBMT multicèntric per avaluar i validar les observacions realitzades en aquest estudi està en curs.

En conclusió, es va trobar una associació entre el genotip CYP2C9 i el Bu MR. Es va observar una disminució de la formació de Su entre els portadors dels al·lels CYP2C9 associats amb una disminució de l'activitat enzimàtica, cosa que suggereix que CYP2C9 té un paper en l'oxidació de THT a Su. Els senyors predictius també predien la falla d’empelt i l’EFS. Es va observar una associació entre els al·lels CYP2B6 que codificaven proteïnes amb una activitat enzimàtica reduïda i una EFS reduïda. Es va proporcionar evidència preliminar sobre els papers del MR i del genotip CYP2B6 per predir el resultat clínic de HSCT; no obstant això, es necessiten estudis addicionals per establir la seva utilitat clínica.

Informació complementària

Documents de paraula

  1. 1.

    Informació complementària

    La informació complementària acompanya el document al lloc web de la revista The Pharmacogenomics (//www.nature.com/tpj)