Interacció entre polimorfismes en el sistema renina-angiotensina i l'ús de l'enzim inhibidor o convertidor d'angiotensines o bloqueig β i el risc d'infart i miocardi la revista farmacogenòmica

Interacció entre polimorfismes en el sistema renina-angiotensina i l'ús de l'enzim inhibidor o convertidor d'angiotensines o bloqueig β i el risc d'infart i miocardi la revista farmacogenòmica

Anonim

Resum

Aquest estudi investiga si la interacció entre inhibidors de l'enzim convertidor d'angiotensina (ACE) o bloquejadors β i el polimorfisme d'inserció / supressió (I / D) o receptor d'angiotensina II tipus 1 (AGTR1) 573C / T polimorfisme modifica el risc d'infart de miocardi (MI) o un ictus. En total, es van incloure 4097 subjectes amb hipertensió arterial en aquest estudi. La interacció medicament-gen amb el risc de patir infart o ictus es va determinar amb un model de risc proporcional Cox. El risc de MI es va reduir en els usuaris actuals d’inhibidors ACE amb el genotip AGTR1 573CT o CC en comparació amb els inhibidors d’ACE amb el genotip AGTR1 573TT (índex de sinergia (SI): 0, 32; 95% d’interval de confiança (CI): 0, 14–0, 70). No s'ha trobat cap interacció significativa entre els medicaments i els gens i el risc de patir un ictus (SI: 0, 82; IC del 95%: 0, 44-1, 52) ni en usuaris bloquejadors β. Tampoc es va trobar cap interacció significativa entre els medicaments i els gens amb el polimorfisme ACE I / D. En conclusió, els subjectes amb almenys una còpia de l’al·lel AGTR1 573C podrien tenir més beneficis de la teràpia inhibidora de l’ACE.

Introducció

La hipertensió arterial és un trastorn freqüent que afecta aproximadament el 20% de les poblacions adultes de la majoria dels països desenvolupats 1 i és un factor de risc important per a malalties cardiovasculars. Molts trets fisiològics, bioquímics i anatòmics contribueixen al nivell de pressió arterial d’un individu, que es manté homeostàticament mitjançant interaccions complexes de sistemes interrelacionats. Un d’aquests sistemes és el sistema renina-angiotensina (RAS), que influeix en l’expressió del precursor de l’angiotensinogen al fetge. En resposta a la pressió arterial disminuïda, l’angiotensinogen és escindit per la renina en l’angiotensina I. L’angiotensina I és escindida per un enzim convertidor d’angiotensina (ACE) per generar l’enzim fisiològicament actiu angiotensina II, que es tradueix en una vasoconstricció.

Dues principals classes de medicaments antihipertensius poden interactuar directament amb el RAS, és a dir, amb els inhibidors de l'ACE i els β-bloquejadors. Els inhibidors ACE inhibeixen la conversió de l’angiotensina I a l’angiotensina II, donant lloc a una reducció de la resistència vascular perifèrica. Els inhibidors de l’ACE també disminueixen la secreció d’aldosterona, cosa que redueix en una disminució de la retenció de sodi i aigua. Els bloquejadors β disminueixen la sortida cardíaca inhibint l’alliberament de renina i actuant sobre els receptors β1.

En l'estudi de Genètica de tractament amb hipertensió (GenHAT), no s'ha trobat cap interacció significativa entre el polimorfisme d'inserció / supressió (I / D) d'ECE i la teràpia amb inhibidors de l'ACE sobre el risc de malalties cardiovasculars. 2 Segons el nostre coneixement, cap estudi previ va investigar el paper del gen del receptor d’angiotensina tipus II (AGTR1) en el risc de patir malalties cardiovasculars.

L’objectiu d’aquest estudi va ser determinar si el risc d’infart de miocardi (MI) o accident cerebrovascular en pacients hipertensos amb inhibidor de l’ACE o β-bloqueador es modifica pel polimorfisme ACE I / D i el polimorfisme AGTR1 573C / T.

Resultats

En total, es van identificar 4097 subjectes amb hipertensió durant el seguiment. D’aquests 4097 subjectes, 1642 van ser tractats amb inhibidors de l’ECE en qualsevol moment, 2387 amb bloquejants β i 2561 amb altres medicaments antihipertensius. És possible que un tema hagi contribuït a una o més categories de classes de medicaments antihipertensius durant el seguiment. En total, el 100% de les mostres es va genotipar amb èxit pel polimorfisme ACE I / D i el 98% pel polimorfisme AGTR1 573C / T. Les taules 1 i 2 mostren les característiques bàsiques estratificades pels genotips ACE I / D i AGTR1 573C / T.

Taula completa

Taula completa

Infart de miocardi

En total, 197 subjectes van experimentar una IM durant el seguiment, dels quals un 30% ja havien tingut una IM abans de l'1 de gener de 1990. Setanta-quatre subjectes tenien una IM mentre que van ser tractats amb β-bloquejadors, dels quals 15 tenien el genotip DD. i 59 tenien el genotip ID o II (taula 3). Quaranta-dos subjectes tractats amb inhibidors de l'ACE van experimentar un MI, dels quals 10 tenien el genotip DD i 32 tenien el genotip ID o II.

Taula completa

Els subjectes amb el genotip DD que actualment van ser tractats amb β-bloquejants tenien un risc similar de MI en comparació amb els subjectes del genotip DD que mai van utilitzar bloquejadors β (proporció de perill ajustada (HR) = 1, 04; 95% interval de confiança (CI): 0, 47 –2.31) (taula 3). Entre els subjectes que no van utilitzar mai β-bloquejadors, el genotip ID o II no es va associar significativament amb el risc de MI (HR = 0, 89; IC del 95%: 0, 53-1, 50). Els subjectes amb el genotip ID o II que es tractaven actualment amb bloquejadors β tenien un risc significativament augmentat de MI (HR = 1, 55; IC del 95%: 0, 80-2, 99) en comparació amb els subjectes amb el genotip DD que mai van utilitzar bloquejadors β. Aquesta HR ha estat superior al valor esperat de l'efecte conjunt del genotip ID o II i dels bloquejadors β a escala multiplicativa (1, 04 × 0, 89 = 0, 93). L’índex de sinergia (SI) es va incrementar de manera no significativa (ajustat SI = 1, 67; IC del 95%: 0, 76-3, 66) (taula 4).

Taula completa

Els subjectes amb el genotip DD que actualment van ser tractats amb inhibidors de l'ACE tenien un risc més gran de MI en comparació amb els subjectes del genotip DD que mai van utilitzar inhibidors de l'ACE (HR = 2, 53; IC del 95%: 1, 06–6, 03) (taula 3). Així mateix, en els tractats amb inhibidors de l'ACE, que tenien genotip ID o II, es va augmentar el risc de MI (HR = 2, 73; IC del 95%: 1, 33–5, 59). El SI per al risc de MI en usuaris d'inhibidors ACE va ser de 0, 84 (IC del 95%: 0, 36–1, 97) (Taula 4).

Dels 4015 subjectes genotipats per al polimorfisme AGTR1 573C / T, 197 subjectes van experimentar una IM (taula 3). Ni el genotip ni l'ús d'un bloqueig β no es van associar significativament amb el risc de MI (Taula 3). A més, la interacció medicament-gen va ser poc significativa (taula 4). Els subjectes amb el genotip TT que actualment van ser tractats amb inhibidors de l'ACE tenien un risc més gran de MI en comparació amb els subjectes del genotip TT que mai van utilitzar inhibidors de l'ACE (HR = 4, 93; IC del 95%: 2, 22-10, 95) (Taula 3). També es va augmentar el risc de MI en subjectes tractats amb inhibidors de l'ACE amb genotip CT o CC (HR = 2, 31; IC del 95%: 1, 09–4, 92). Aquesta HR ha estat inferior a l'esperat de l'efecte conjunt del genotip CT o CC i dels inhibidors de l'ACE a escala multiplicativa (4, 93 × 1, 49 = 7, 35). El SI es va reduir significativament (SI = 0, 32; IC del 95%: 0, 14–0, 70) (taula 4). Tot i això, no es va observar un efecte de dosi-resposta al·lel (CT versus TT genot SI = 0, 35; 95% CI: 0, 15–0, 82 i CC versus TT genotip SI = 0, 59; 95% CI: 0, 24–1.49).

Anàlisis addicionals en què es van fer ajustaments del nivell de pressió arterial sistòlica, nivell de pressió arterial diastòlica, història d’angina, ús d’àcid acetilsalicílic (ASA), ús de coumarins, ús de AINEs, ús de medicaments antidiabètics i antecedents d’ictus i tabaquisme produït. resultats similars i per tant no es van mostrar. A més, l’exclusió de tots els subjectes que tenien una IM abans del 1990 va donar resultats similars i, per tant, no es va mostrar. Quan es va repetir l’anàlisi amb altres classes de medicaments antihipertensius (és a dir, diürètics de sostre baix, diürètics de sostre alt o antagonistes de calci), es va produir una interacció significativa entre el polimorfisme AGTR1 573C / T i els diürètics de sostre alt (SI = 0, 39; IC del 95%: 0, 17–0, 88).

Quan vam combinar els al·lels de risc (ID o II i CT o TT) dels dos polimorfismes, el risc de MI es va incrementar significativament en els usuaris d’inhibidors ACE (taula 5). A més, ambdós al·lels de risc van augmentar el risc de MI (HR = 1, 47; IC del 95%: 1, 00-2, 14) en usuaris que no inhibeixen l’ACE en comparació amb els usuaris que no inhibeixen l’ACE amb 0 o sense al·lels de risc (DD i CC; ID o ID II i CC; DD i CT o TT). Aquest efecte no es va veure en usuaris no bloquejadors de β (HR = 1.02; IC del 95%: 0.63-11.65). Tot i això, els SI no eren significatius (bloquejant β SI = 1, 23; IC del 95%: 0, 66-2, 28; Inhibidors ACE SI = 0, 53; IC del 95%: 0, 25–1, 11).

Taula completa

Ictus

En total, 382 subjectes genotipats per al polimorfisme ACE I / D van patir un ictus durant el seguiment, dels quals el 14% ja havien patit un ictus abans de l’1 de gener de 1990. D’aquests 382 subjectes, 108 van patir un ictus quan van ser tractats. amb un bloquejador β, dels quals 24 tenien el genotip DD. En total, 68 subjectes van patir un ictus durant la teràpia inhibidora de l’ACE, dels quals 12 tenien el genotip DD (taula 6).

Taula completa

Per investigar la possible interacció entre usuaris bloquejadors β o inhibidors de l'ACE i el polimorfisme ACE I / D sobre el risc d'ictus, els participants es van agrupar per l'ús actual i el grup genotip (taula 6). La interacció entre l'ús actual de β-blocker i el polimorfisme ACE I / D sobre el risc de patir un ictus va ser poc significativa (SI = 1, 10; IC del 95%: 0, 62-194) (Taula 7). El SI en els usuaris d’inhibidors ACE també es va incrementar de manera poc significativa (SI = 1, 76; IC del 95%: 0, 88-3, 50) (Taula 7).

Taula completa

En total, 344 subjectes genotipats per al polimorfisme AGTR1 573C / T van patir un ictus durant el seguiment. D’aquests 344 subjectes, 103 van tenir un ictus quan van ser tractats amb un β-bloquejador, i 64 durant la teràpia amb inhibidors de l’ACE (taula 5). La interacció entre l’ús actual de bloquejadors β i el polimorfisme 573C / T amb el risc d’ictus només era significativa a la frontera (SI = 1, 80; IC del 95%: 1, 00-3, 24). Les anàlisis només amb ictus isquèmics ( n = 188) eren similars, però ja no eren significatives. A més, no hi va haver un efecte de resposta a dosi d'al·lel. No hi va haver cap interacció significativa entre l’ús d’inhibidors ACE i el polimorfisme 573C / T (SI = 0, 82; IC del 95%: 0, 44-1, 52).

Anàlisis addicionals en què es van fer ajustaments del nivell de pressió arterial sistòlica, nivell de pressió arterial diastòlica, antecedents d’angina, ús d’ASA, ús de coumarins, ús de AINEs, ús de medicaments antidiabètics i antecedents d’ictus i tabaquisme van obtenir resultats similars. per tant no es mostra Quan es va repetir l’anàlisi amb altres classes de medicaments antihipertensius (és a dir, diürètics de sostre baix, diürètics de sostre alt o antagonistes de calci), no hi va haver cap interacció significativa entre els medicaments i els gens amb cap d’aquests tipus de medicaments antihipertensius amb cap dels genotips. A més, les anàlisis addicionals amb només cops isquèmics ( n = 188) eren poc importants. A més, l’exclusió de tots els subjectes que van patir un ictus abans del 1990 va donar resultats similars i per tant no es va mostrar.

Una combinació dels al·lels de risc dels dos polimorfismes no va revelar cap associació amb el risc d’ictus (taula 8). A més, cap dels SI no va ser significatiu (β-bloquejant SI = 1, 54; IC del 95%: 0, 92-2, 57; Inhibidors ACE SI = 1, 29; IC del 95%: 0, 72-2, 29), cosa que suggereix que no hi ha una forta interacció medicament-gen-gen en el risc d’ictus.

Taula completa

Discussió

En aquest estudi no s'ha trobat cap interacció significativa entre l'ús d'inhibidors ACE o bloquejadors β i el polimorfisme ACE I / D amb risc de patir infart o ictus. S'ha trobat una interacció entre el polimorfisme AGTR1 573C / T i l'ús actual d'inhibidors ACE pel risc de patir MI. L’efecte articular va ser aproximadament tres vegades menor del previst segons els seus efectes individuals, tot i que no es va observar cap relació d’al·lel dosi-resposta. A més, no es va trobar cap interacció significativa entre els medicaments i els gens en els usuaris inhibidors de l'ACE pel risc d'ictus i només un límit fronterer va augmentar el risc d'ictus en els usuaris actuals de bloquejadors β amb almenys una còpia de l'al·lel C en comparació amb els bloquejadors β amb el genotip TT, que ja no era significatiu quan només incloïem casos amb ictus isquèmics. Com que teníem més usuaris inhibidors de l’ACE o bloquejadors β que patien un ictus que un IM, vam tenir més poder per detectar una interacció medicament-gen amb risc de patir un ictus. La combinació d’ambdues variants de risc d’ambdós polimorfismes no va augmentar ni disminuir estadísticament el risc d’IM o l’ictus, cosa que pot ser compatible no només amb l’absència d’interacció, sinó també amb el menor nombre de casos d’AC i amb ictus amb tots dos al·lels de risc.

Arnett et al. 2 va informar que la taxa de risc de 6 anys per malalties coronàries mortals i no fatals al grup del genotip DD no era estadísticament diferent del grup genotip ID i II en usuaris inhibidors de l'ACE en l'estudi GenHAT. En el nostre estudi observacional, vam confirmar aquesta troballa. Segons el nostre coneixement, no hi ha estudis previs que hagin investigat si hi ha una interacció gen-fàrmac entre la AGTR1 573C / T i la terapia inhibidora de l'ACE o la teràpia β-bloquejadora amb risc de patir infart o ictus o un altre resultat cardiovascular. Benetos et al. 3 van trobar una reducció significativament més gran de la pressió arterial i la velocitat de l’ona de pols caròtid-femoral amb el polimorfisme AGTR1 1166A / C (exon 5) en 40 pacients tractats amb inhibidors de l’ACE. No obstant això, Hingorani et al. 4 no van trobar cap associació significativa entre el polimorfisme 1166A / C i la pressió arterial en els usuaris d'inhibidors de l'ACE. Tot i que no es va estudiar l'efecte del polimorfisme 1166A / C, la distància entre el polimorfisme AGTR1 1166A / C i el polimorfisme 573C / T és d'aproximadament 500 pb, i per tant, aquests polimorfismes tenen més probabilitats de desajustar-se entre ells. El risc de patir infiltracions cerebrals en els usuaris inhibidors ACE actuals es va incrementar significativament en comparació amb els no usuaris. Confondre amb indicació podria explicar aquestes troballes. Com que el metge va ser lliure de triar si un pacient va rebre un tractament antihipertensiu o no i el tipus de medicament antihipertensiu, algunes característiques específiques del pacient podrien haver influït en aquesta decisió. Tanmateix, la interacció entre els bloquejadors β o els inhibidors de l’ACE i el polimorfisme AGTR1 573C / T probablement no està influenciada per aquest biaix, ja que els usuaris de la mateixa classe de medicaments antihipertensius probablement tindran les mateixes característiques i el receptor desconeix el subjecte. genotip.

La limitació principal del nostre estudi és el nombre relativament reduït d’esdeveniments. Per tant, potser hem trobat a faltar una interacció medicament-gen amb un efecte reduït. A més, tot i que els usuaris actuals d’inhibidors ACE amb almenys una còpia de l’al·lel AGTR1 573C tenien un augment de risc d’IM en aquest estudi, els resultats encara s’han d’interpretar amb precaució perquè no sembla que hi hagués un efecte de dosi-resposta al·lel. i l'efecte en els usuaris de bloquejadors β en el risc d'ictus va ser en el sentit contrari. Per tant, aquests resultats s’han de replicar en altres estudis abans de treure conclusions definitives. A més, a causa de les mides limitades de les mostres, no vam poder provar les relacions entre dosi i resposta i durada-resposta. Una altra limitació és que només es va investigar un polimorfisme del gen ACE i AGTR1 i, per tant, no podem excloure la possibilitat que un altre polimorfisme d’aquests gens pugui influir en la resposta a inhibidors de ACE o β-bloquejadors.

En conclusió, els nostres resultats indiquen que el genotip AGTR1 573CT o TT podria estar associat a un augment del risc de MI en usuaris d'inhibidors de l'ACE, tot i que es necessiten investigacions posteriors per aclarir el paper d'aquest polimorfisme abans que es puguin fer conclusions definitives.

Materials i mètodes

Ambientació

L’estudi de Rotterdam es va iniciar el 1990 com a estudi de seguiment prospectiu basat en la població. Els 10 275 residents del barri del Ommoord de Rotterdam, de 55 anys o més, van ser convidats a participar-hi. En total, 7983 (78%) subjectes van donar el seu consentiment per escrit. Les mesures basals van tenir lloc fins al 1993. El disseny d’aquest estudi s’ha descrit en altres llocs. Es va recollir informació sobre edat, sexe, estat de salut actual i antecedents mèdics, incloent-hi IM i AVC anteriors. Es van verificar tots els MIC o accidents cerebrovasculars relatius a la línia de base amb els registres mèdics. Durant un examen físic, es va mesurar la pressió arterial, el pes i l'alçada i es va extreure sang per extreure l'ADN. Des de l'inici de l'estudi de Rotterdam, es realitzen exàmens de seguiment cada 2 a 3 anys.

Definició de cohort i de resultats

Només es van incloure en aquest estudi els subjectes amb hipertensió artística a partir de l'1 de gener de 1991. Per tant, el seguiment va començar el dia que es va mesurar la pressió arterial elevada i / o el dia que es va prescriure un primer medicament antihipertensiu. Les dades de pressió arterial de les tres proves d'examen es van utilitzar per determinar si una persona tenia hipertensió. Si la primera persona tenia una pressió arterial elevada (160 / 95 mm Hg i / o es tractava amb agents antihipertensius) durant el primer examen, es considerava hipertensiu a partir d'ara. Si una persona era hipertensiva durant el segon examen, es considerava hipertensiu a partir d'aleshores. La definició 'antiga' d'hipertensió va ser aplicada a causa de l'inici de l'estudi el 1990.

Es van excloure casos de malaltia vascular cerebral i accidents cerebrovasculars entre l'1 de gener i l'1 de juliol de 1991, ja que els registres de farmàcia no estaven disponibles abans de l'1 de gener de 1991 i, per tant, la història dels seus medicaments era inferior a 6 mesos. Tot i això, no es van excloure els casos si tenien un IM (o un ictus) abans de l’1 de gener de 1991 i un segon MI (o un ictus) després de l’1 de juliol de 1991 (casos prevalents). El final de l'estudi es va fixar a l'1 de gener de 2002. El seguiment va finalitzar a la data del primer MI (o primer traç per a l'anàlisi amb ictus com a resultat primari) o d'un esdeveniment de censura (final del període d'estudi, sortint del programa zona o mort), segons el primer. Tots els esdeveniments coronaris recollits es van verificar mitjançant una revisió dels informes d’alta hospitalària i cartes d’especialistes mèdics i després es van classificar com a IM definitiva i possible. Dos metges d’investigació van codificar els esdeveniments de manera independent segons la Classificació Internacional de Malalties, 10a revisió (ICD-10). 6 MI es va definir com a codi ICD I21. Un expert mèdic en malalties cardiovasculars també va revisar tots els esdeveniments codificats per a la classificació final.

L'ictus es va definir com a codi ICD K90. Els metges d’investigació cerebral van revisar informació sobre tots els possibles ictus i atacs isquèmics transitoris; un neuròleg amb ictus experimentat va verificar tot el diagnòstic. Es van excloure hemorràgies subaracnoides i accidents cerebrovasculars. Es van diagnosticar accidents cerebrovasculars isquèmics quan un pacient tenia símptomes típics, i una tomografia computaritzada i una imatge de ressonància magnètica que es van fer al cap de quatre setmanes van descartar altres diagnòstics o quan hi havia proves indirectes (dèficit limitat a una extremitat o resolta completament en les 72 h, fibril·lació auricular a la absència d’anticoagulants) assenyalats a un caràcter isquèmic de l’ictus. Es va diagnosticar un ictus hemorràgic quan es va mostrar una hemorragia rellevant a la tomografia computada o a la ressonància magnètica, o quan el subjecte va perdre la consciència definitivament o va morir en poques hores després de l’aparició dels signes focals. Si un cop no coincideix amb aquests criteris, es classificava com a no especificat. La subclassificació en ictus hemorràgics i isquèmics es va basar en la neuroimatge, disponible per al 64% de tots els casos.

Definició d’exposició

Els registres de farmàcia estaven disponibles per aproximadament el 99% de la cohort a partir de l'1 de gener de 1991. Aquests registres inclouen el nom del medicament, el dia de la seva distribució, la forma de dosificació, el nombre d'unitats distribuïdes, la dosi diària prescrita i la química anatòmica terapèutica. codi del medicament. 8 L’exposició d’interès va incloure inhibidors ACE i bloquejadors β a causa del seu efecte directe sobre el RAS.

Quan es va produir un IM o un ictus, es va definir la data com a data de l’esdeveniment i es va calcular per a cada participant la durada acumulada d’ús per a l’exposició actual i passada de totes les classes de medicaments antihipertensius en aquesta data. Primer es calcula cada longitud de la prescripció dividint el nombre de comprimits o càpsules distribuïdes pel nombre diari prescrit. Cada recàrrega a la farmàcia, que es va produir als 7 dies després de l’última ingesta de la recepta anterior, va ser considerada com un episodi de fàrmac continu. Ús actual, passat i mai es van definir com a categories mútuament excloents. Quan l'esdeveniment va entrar dins d'un període d'ús, es va considerar que el pacient estava exposat actualment i es va calcular el nombre acumulat de dies d'ús actual. De la mateixa manera, per a aquells que no eren usuaris actuals, sinó que havien utilitzat un representant del grup de drogues en el passat, es va calcular el nombre de dies des de l’última ingesta. Es va considerar que no eren usuaris els que no havien consumit el fàrmac durant el període de seguiment. Per a associacions amb dosis, hem utilitzat les dosis diàries definides, que consisteixen en la dosi diària recomanada per a la hipertensió indicada en un adult.

Genotipat

L’ADN genòmic es va extreure de mostres de sang sencera mitjançant mètodes estàndard descrits anteriorment. 9 Els al·lels I i D del polimorfisme ACE I / D es van identificar a partir de la tècnica PCR segons el mètode de Lindpaintner et al. 10 amb algunes modificacions. Com que l’al·lel D en mostres heterozigots s’amplia preferentment, hi ha una tendència de classificació errònia per a un 4-5% de la ID als genotips DD. Per aquesta raó, es va realitzar una segona PCR amb un parell d’imprimació que reconeix una seqüència específica d’inserció (5′-TGGGACCACAGCGCCCACTAC-3 ′ i 5′-TCGCCAGCCCTCCCATGCCCATAA-3 ′). La reacció va produir un amplicó de 335 pb només si hi era present l’al·lel I. Dos investigadors independents van llegir imatges de cada gel i es van analitzar totes les mostres ambigües per segona vegada. El polimorfisme AGTR1 573 C / T (rs5182) es genotipà amb una discriminació al·lèlica TaqMan Assays-By-Design (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA). Les seqüències d’imprimació cap endavant i inversa eren 5′-TGTGCTTTCCATTATGAGTCCCAAA-3 ′ i 5′-CAGAAAAGGAAACAGGAAACCCAGTATA-3 ′ i les sondes menors d’enquadernació eren 5′-CTATCGGGAGGGTTG-3 ′ (VIC) i 5′-TGGG (GMT) Els assajos van utilitzar 5 ng d'ADN genòmic i 2 µl de volums de reacció. El protocol d’amplificació i extensió va ser el següent: un primer pas d’activació de 10 min a 95 ° C va precedir 40 cicles de desnaturalització a 95 ° C durant 15 s i el recuit i l’extensió a 50 ° C durant 60 s. A continuació, es va analitzar la fluorescència específica dels al·lels en un sistema de detecció de seqüències ABI Prism 7900HT amb SDS v 2.1 (Applied Biosystems).

Confusions potencials

Per a l'anàlisi amb IM com a resultat, hem considerat l'edat, el gènere, la pressió arterial sistòlica / diastòlica, l'índex de massa corporal, el tabaquisme actual i passat i el nivell de colesterol (colesterol total / colesterol d'alta densitat) a la línia de referència com a possibles confusions. Ajustaments per antecedents d’ictus, història de l’IM, història de l’angioplàstia coronària transluminal percutània (PTCA), antecedents d’empelt per bypass de l’arteria coronària (CABG), ús d’estatina, ús de cumarina, ús d’ASA, ús de NSAID, ús de nitrats, ús de medicaments antidiabètics, antecedents d’angina, l’ús passat i actual d’altres medicaments antihipertensius i la dosi diària definida es van fer com a covariables dependents del temps. Ens vam ajustar a l’ús combinat d’altres classes de medicaments antihipertensius afegint cada classe de medicaments antihipertensius per separat als models anteriors i actuals. La història de l’angina es va definir com l’ús de dues o més receptes de nitrat.

Per a l’anàlisi amb l’ictus com a punt final, vam considerar els mateixos possibles confusors, però van combinar la història de l’IM, la història de l’angioplàstia coronària transluminal percutània i la història de l’interior de l’arteria coronària per l’empelt en una variable (malaltia coronària).

Anàlisis estadístiques

Es van analitzar els resultats de la IM i l'ictus per separat a causa de la seva diferent etiologia. Ambdós esdeveniments es van avaluar mitjançant un model de risc proporcional Cox amb una exposició variable en el temps per a cada classe de medicaments antihipertensius per separat. Vam crear variables categòriques no acumulatives depenents del temps (sí / no) per a l'ús actual de fàrmacs antihipertensius, actuals i passats, i el temps de seguiment va ser l'eix temporal del model. No ús d’inhibidors ACE (en l’anàlisi de l’associació entre els inhibidors de l’ACE i el risc d’IM o accident vascular cerebral) i no ús de β-bloquejadors (en l’anàlisi de l’associació entre β-bloquejadors i el risc de MI o ictus) ) va servir de referència. Les associacions es van expressar com a recursos humans amb un IC del 95%. Ens vam ajustar a totes les possibles confusions que van provocar un canvi d’estimació puntual d’un 10% o més.

Es va calcular el SI, que és la relació de la RH en els susceptibles a la dels no susceptibles. Per investigar, per exemple, la interacció entre el polimorfisme ACE I / D i els inhibidors de l'ACE, es va afegir una variable maniquí al model: al·lel I (0/1) × inhibidors ACE (0/1). Un SI d’1 significa que els recursos humans en els dos subgrups són els mateixos i que no hi ha cap interacció a escala multiplicativa. Un SI superior a 1 significa que l'efecte conjunt del gen i del medicament és més gran del que s'esperava del producte dels seus efectes individuals. 11 A més, per a les anàlisis del gen-fàrmac-gen, vam combinar al·lels de risc (ID o II i CT o TT) dels dos polimorfismes i es van analitzar les dades respecte a tots els altres grups genòtics (DD i CC; ID o II i CC; DD i CT o TT).

Totes les anàlisis es van fer mitjançant la versió 9.1 de SAS (Institut SAS, Vary, NC, EUA).

Glossari

AS

Enzim convertidor d’angiotensina

AGTR1

receptor tipus 1 de l’angiotensina

MI

infart de miocardi

RAS

Sistema renina – angiotensina

Dualitat d’interès

Cap declarat.