L'hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina està associada a subtipus genòmics específics de l'antigen antigènic de leucòcits humans en pacients japonesos: un estudi preliminar del cas | la revista farmacogenòmica

L'hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina està associada a subtipus genòmics específics de l'antigen antigènic de leucòcits humans en pacients japonesos: un estudi preliminar del cas | la revista farmacogenòmica

Anonim

Resum

Els factors de risc genètics de l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina es van determinar en 22 pacients japonesos amb hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina i en 85 pacients japonesos que van tolerar la teràpia amb ticlopidina sense experimentar reaccions adverses. Hi va haver una correlació significativa entre l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina i els cinc al·lels del leucòcit humà (HLA): HLA-A * 3303, HLA-B * 4403, HLA-Cw * 1403, HLA-DRB1 * 1302 i HLA-DQB1 * 0604 ( probabilitat corregida ( P ) -valor ( Pc ) <0, 01). En particular, HLA-A * 3303 estava present en 15 (68%) dels 22 pacients amb hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina i en 12 (14%) dels 85 pacients tolerants a la ticlopidina (proporció de probabilitat, 13, 04; interval de confiança del 95% (CI) ), 4, 40–38, 59; el valor P corregit ( Pc ) = 1, 24 × 10 –5 ). HLA-A * 3303 estava present en 12 (86%) dels 14 pacients amb hepatotoxicitat colestàtica induïda per la ticlopidina (proporció de probabilitats, 36, 50; IC del 95%, 7, 25-183, 82, Pc = 7, 32 × 10–7). L'hepatotoxicitat severa produïda per la Ticlopidina es va produir amb més freqüència en pacients amb HLA-A * 3303 i el seu haplotip en pacients japonesos. Aquests descobriments poden explicar l'alta incidència de l'hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina en pacients japonesos mediada mitjançant un mecanisme immunitzat.

Introducció

La ticlopidina, un agent antiplaquetari, ha estat àmpliament utilitzada per a la prevenció secundària de l’aterotrombosi. 1 Es pot produir una hepatotoxicitat severa, principalment de tipus colestàtic, amb tractament amb ticlopidina, 2 i sembla haver-hi una taxa més gran de reaccions adverses hepàtiques en japonès en comparació amb pacients caucàsics. 3

Hi ha diversos informes que indiquen que l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina és causada per una reacció 4, 5, 6 mediada per la immunitat i, per tant, indica una toxicitat idiosincràtica. La toxicitat idiosincràtica pot ser causada per un metabolit (s) reactiu al fàrmac, del qual un anell conegut és l’anell de tiofè de ticlopidina. 7 Per exemple, l’àcid tienílic, un medicament diürètic que conté tiofè que va ser retirat del mercat, es metabolitza mitjançant el citocrom CYP2C9 8 per obtenir un metabolit reactiu que s’uneix covalentment a diverses macromolècules, inclòs el propi CYP2C9. Es creu que els mecanismes mediats per la immunitat mitjançant aquest enllaç covalent estan associats a una hepatotoxicitat induïda per fàrmacs. 10, 11 Per tant , hem hipotetitzat que l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina podria estar mediada per un mecanisme similar, i hem cercat gens que codifiquin CYPs que catalitzin l’activació metabòlica de la ticlopidina, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 metabolit reactiu de la ticlopidina (s) enzims desintoxicants com el glutatió S -transferasa, 19 i proteïnes associades centrades en polimorfismes que poden afectar l'activitat de l'enzim i la substitució d'aminoàcids, així com aquells per als quals s'ha confirmat variant en japonès (publicat a la literatura i en línia bases de dades cercables). A més, ja que hi ha evidències que avalen una relació entre hepatotoxicitat induïda per fàrmacs i genòtic antigen leucòcit (HLA), genotip de 20, 21, 22, 23, 24, tres HLA de classe I (HLA-A, B i C) i 3 HLA També es van investigar els loci de classe II (HLA-DRB1, DQB1 i DPB1). En aquest document, informem de les nostres dades preliminars sobre HLA i altres factors farmacogenòmics potencials associats a l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina observada mitjançant la realització d’un estudi de control de casos inigualable en pacients japonesos.

Resultats

Es va notar una forta correlació entre l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina i cinc al·lels HLA com HLA-A * 3303, HLA-B * 4403, HLA-Cw * 1403, HLA-DRB1 * 1302 i HLA-DQB1 * 0604 (probabilitat corregida ( P ) -valor ( Pc ) <0, 01; Taula 1). Tot i que HLA-A * 3303 només estava present en 12 (14%) dels 85 controls, va estar present en 15 (68%) dels 22 casos amb totes les hepatotoxicitats induïdes per la ticlopidina (proporció de pronòstic, 13, 04; interval de confiança del 95% ( CI), 4, 40–38, 59; el valor P corregit ( Pc ) = 1, 24 × 10 –5 ) i en 12 (86%) dels 14 casos amb hepatotoxicitat de tipus colestàtic (proporció de probabilitat, 36, 50; IC del 95% 7, 25-183, 82 ; Pc = 7, 32 × 10 –7 ). Es va trobar un haplotip específic de HLA (HLA-A * 3303, -B * 4403, -Cw * 1403, -DRB1 * 1302, -DQB1 * 0604) en 12 (55%) dels 22 casos amb totes les hepatotoxicitats induïdes per ticlopidina, inclosos 10 pacients amb hepatotoxicitat colestàtica, mentre que només es va observar en nou (11%) dels 85 controls (taula 1).

Taula completa

En el grup de casos, cap dels pacients sense HLA-A * 3303 no tenia HLA-B * 4403, HLA-Cw * 1403, HLA-DRB1 * 1302 o HLA-DQB1 * 0604 (taula 2, destacada en negreta). Entre els pacients amb danys de tipus hepatocel·lular, cap ha presentat HLA-A * 3303, -B * 4403, -Cw * 1403, -DRB1 * 1302 o -DQB1 * 0604 (taula 2).

Taula completa

No es va observar cap dada significativa ( P <0.01) sobre els altres genotips que es suposa que estiguessin relacionats amb el metabolisme, i no es van observar vies d’estrès oxidatiu de la ticlopidina en relació amb l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina, en contrast marcat amb els nostres resultats amb valors de Pc altament significatius ( Es van obtenir 0, 00908–7, 32 × 10 –7 ) entre els genotips HLA i l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina.

Discussió

S'ha reportat hepatotoxicitat severa en pacients tractats amb ticlopidina. 2 La freqüència d'aquests esdeveniments sembla més alta al Japó que als països occidentals. 3 Els nostres resultats suggereixen que la presència de HLA-A * 3303 és un fort factor de risc per a l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina, especialment el tipus colestàtic greu, en pacients japonesos. El present estudi va identificar una associació potencial entre hepatotoxicitat induïda per ticlopidina i HLA-A * 3303, ja sigui sola o com a part d’un haplotip HLA específic (HLA-A * 3303, -B * 4403, -Cw * 1403, -DRB1 * 1302 i -DQB1 * 0604). Aquests cinc al·lels HLA presenten un desequilibri de vincle mutu i són el segon haplotip més comú a la població japonesa amb una freqüència del 4, 8%. 25 Una enquesta de la freqüència d’al·lels i l’haplotip per a HLA classe I de cinc grups ètnics d’Amèrica del Nord va demostrar que la freqüència d’al·lel de HLA-A * 3303 és del 0, 53% en els caucàsics i de l’11, 70% en els asiàtics 26 (japonesos, 9, 7% 25 ) . La freqüència de l'haplotip HLA-A * 3303-B * 4403-Cw * 1403 va ser del 2, 09% en els asiàtics (japonesos, 5, 8% 25 ), però <0, 6% en els caucàsics. També s'han reportat correlacions significatives entre diverses toxicitats idiosincràtiques induïdes per fàrmacs i al·lels HLA específics. 20, 21, 22, 23, 24 Com que la proteïna HLA juga un paper clau en les reaccions relacionades amb la immunitat, l’associació observada en el present estudi suggereix probablement un mecanisme immunitzat i també pot explicar la major incidència d’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina en japonès. pacients.

Atès que la distribució del genotip no es va desviar significativament de l'equilibri de Hardy-Weinberg, creiem que els mètodes de genotipat utilitzats en el present estudi són fiables. Tanmateix, en aquest estudi inigualable, entre els casos i controls no es van valorar possibles confusions com ara malalties hepàtiques anteriors, esdeveniments adversos com l’hepatitis induïda per fàrmacs i el consum d’alcohol. Per tant, les investigacions prèvies haurien de confirmar-se mitjançant investigacions posteriors, amb un nombre més gran de casos i controls coincidents. Aquests estudis ens poden proporcionar una millor comprensió de les associacions que hem observat en una mostra de mida petita de pacients japonesos. Es desconeix si la nostra conclusió es pot extrapolar a altres ètnies.

Temes i mètodes

Temes

Es van identificar 22 pacients japonesos amb hepatotoxicitat (casos) induïda per ticlopidina i 85 pacients que no van tenir reaccions adverses durant el tractament amb ticlopidina (controls). El diagnòstic d’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina es va basar en la història clínica i en les troballes de laboratori (bilirubina sèrica> 1, 5 mg / dL o sèrum aspartate aminotransferasa (AST) o alanina aminotransferasa (ALT) com a mínim el doble del límit superior del normal). Els casos es van dividir en tres categories de lesions hepàtiques induïdes per fàrmacs segons els 27 criteris de Danan sobre hepatotoxicitat cholestatic ( n = 14), dany mixt ( n = 5) i hepatocel·lular ( n = 3). No hi va haver diferències d’edat, sexe o dosi de ticlopidina entre els dos grups. D’acord amb la classificació genètica antropològica de la població japonesa basada en freqüències d’al·lel HLA o haplotip, tots els pacients inclosos en aquest estudi eren japonesos hondo (la majoria de la població del Japó contemporani); en conseqüència, el cas i grups de control d’aquest estudi es poden considerar antropològicament com un subgrup ètnic del japonès des del punt de vista genètic. Tots els pacients van proporcionar un consentiment informat per participar i les mostres de sang eren anònimes. L’estudi va ser aprovat pels comitès d’ètica de Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd i de cada institució participant. El protocol s’ajusta a les directrius ètiques per a la investigació del genoma humà / gènic al Japó i a les directrius ètiques de la declaració de Hèlsinki de 1975.

Genotipat

Es van seleccionar els següents 12 gens coneguts per estar implicats en el metabolisme dels medicaments i les vies d’estrès oxidatiu: CYP1A1 , CYP1A2 , CYP2B6 , CYP2C9 , CYP2C19 , CYP2D6 , CYP3A4 , glutatió sintasa ( GSS ), glutatió S- transfase 1 El factor 2 relacionat amb el factor nuclear 2- eritroïde ( Nrf2 ), la proteïna 1 relacionada amb Kelch com ECH ( KEAP1 ) i l’hemooxigenasa 1 ( HMOX1 ). Noventa-sis loci polimòrfics d'aquests gens van ser genotipats mitjançant polimorfisme de longitud de fragment de reacció de restricció de cadena de la polimerasa (PCR-RFLP), polimorfisme conformacional monocatenari (PCR-SSCP) o seqüenciació directa. A més, tres locis de classe I HLA (HLA-A, B i C) i tres loci de classe II HLA (HLA-DRB1, DQB1 i DPB1) van ser genotipats mitjançant el mètode de primerrs específics de la seqüència PCR (SSP). Tot el personal del laboratori va quedar invident sobre si les mostres provenien de casos o controls.

Anàlisi estadística

La prova exacta de Fisher es va utilitzar per avaluar la importància de les diferències entre els casos i els controls sobre les freqüències de polimorfismes genètics relacionats amb el metabolisme de la ticlopidina. Es va acceptar significació amb un valor P de <0, 05. També es calculen quotes de proporcions i IC del 95% per estimar la força de l’associació entre mutacions a diferents punts de lloc i l’aparició d’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina. La importància de l’associació entre els al·lels HLA i l’hepatotoxicitat induïda per la ticlopidina es va avaluar mitjançant l’anàlisi de la taula de contingència χ 2 amb la correcció de Yates i per la prova t . Les relacions de probabilitats es calculen a partir de la relació entre els productes entre les entrades de la taula χ 2 2 × 2. Pc també es va calcular com el producte del valor P i el nombre d’al·lels provats en cada locus. Es va acceptar el pc <0, 05 com a estadísticament significatiu.

Dualitat d’interès

Aquest estudi va comptar amb el suport de Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd.